novela Coronavirus (2019-nCoV) Nucleico kit de detección de ácido (Fluorescente RT-PCR)

【Destinado Utilice】

El kit es un TaqMan sonda fluorescente en tiempo real PCR para detectar cualitativamente ORF1ab, n genes nucleicos ácido de 2019-nCoV en frotis faríngeo, esputo en pacientes con sospecha de síntomas de neumonía y casos de agrupamiento.

Los resultados de la prueba son solo para referencia clínica y no pueden ser considerado como único punto de referencia para el diagnóstico clínico. Se recomienda realizar análisis manifiesto con respecto a síntomas clínicos y otros resultados de laboratorio.

operadores deberían tener experiencia de formación profesional en amplificación de genes o pruebas de métodos de biología molecular, y tener las calificaciones pertinentes para operaciones de laboratorio. El laboratorio debería tener precauciones de seguridad biológica y procedimientos de protección razonables.

【 principio de prueba 】

en este kit, los cebadores y las sondas están diseñados para las regiones conservadas y específicas de ORF1ab, n de 2019-nCoV, respectivamente. fluorescente PCR se utiliza para detectar el ARN viral después de nucleico purificación ácida de muestra ARN.

Este kit de prueba utiliza fluorescente en tiempo real PCR tecnología.Durante PCR amplificación, la sonda se une a la plantilla y el extremo 5 ' el grupo informador de la sonda es escindido por el Taq enzima (5 '→ 3' actividad exonucleasa), alejándose así de el grupo de extinción para generar una señal fluorescente. La curva de amplificación en tiempo real se traza automáticamente en función de la señal de fluorescencia detectada y se calcula el valor de ct de la muestra (el número de ciclos experimentados cuando la señal de fluorescencia en cada tubo de reacción alcanza el umbral establecido). FAM , VIC y rojo texas fluoróforos están utalizados marcar ORF1ab gen, n sondas genéticas en reacción solución. mediante el uso de una prueba, la detección cualitativa de los dos genes anteriores de 2019-nCoV se puede realizar simultáneamente.

Para Para evitar el resultado falso negativo, el kit está provisto de un control interno (IC), que está marcado con Cy5 grupo fluorescente que podría utilizarse para controlar el procedimiento de extracción y la solución de reacción.

【 componentes principales 】

Nota ¹ : Los diferentes lotes de componentes no pueden ser intercambiado.

Nota ² : El kit de prueba no contienen nucleico reactivo de extracción de ácido, prepare el reactivo antes de su uso.

1. manejo de muestras

añadir 10μL de control interno en 200μL de control positivo y control negativo, respectivamente en cuanto a realizar el nucleico extracción de ácido.

2. reactivo preparación:

sistema preparación: tomar preinstalado Nucleico liofilizador de amplificación de ácido, seguido de la apertura de la bolsa de aluminio y centrifugarlo inmediatamente. cantidad de muestra de cada prueba debería ser los múltiplos de 8 que contienen un control positivo y uno negativo control.add 35μL libre de nucleasas agua sobre cada tubo de reacción.

3.Muestra Cargando:

añadir 5μL muestra nucleico ácido a ensayar, control positivo, control negativo que el volumen total de reacción sea 40 μL en la reacción asignada solución. para no no necesita una mezcla fina, y simplemente cierre la tapa de PCR tubo de reacción, centrifugar el líquido en la pared del tubo sobre el fondo del tubo, por lo tanto, procese el PCR amplificación.

después de la verificación, se estima que la adición de 5μL-10μL aceite de parafina en el PCR El sistema no afectará al PCR resultado pero evite la contaminación y la vaporización del líquido.